魚蝦病毒檢測儀是水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域的重要工具，通過實時定量聚合酶鏈式反應(yīng)（qPCR）技術(shù)，可快速、精準地檢測魚類和蝦類攜帶的病毒，如對蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）、蝦肝腸胞蟲（EHP）、致急性肝胰腺壞死病副溶血性弧菌等。正確使用設(shè)備并遵循注意事項，不僅能提高檢測效率，還能延長儀器壽命，保障檢測結(jié)果的可靠性。本文將從操作流程、樣本處理、安全規(guī)范及維護要點四個方面，系統(tǒng)介紹魚蝦病毒檢測儀的使用方法與注意事項。

一、操作流程：標準化步驟確保檢測精準

1. 儀器準備

開機自檢：接通電源（~220V/50Hz），啟動儀器，等待系統(tǒng)完成自檢（約1-2分鐘），確認熒光檢測系統(tǒng)、熱循環(huán)模塊無異常報警。

參數(shù)設(shè)置：根據(jù)檢測病毒類型，在軟件界面選擇對應(yīng)引物/探針組合（如WSSV檢測需選擇FAM通道，EHP檢測選擇HEX通道），設(shè)置循環(huán)參數(shù)（預(yù)變性95℃×3分鐘，變性95℃×10秒，退火/延伸60℃×30秒，共40個循環(huán)）。

2. 樣本加樣

樣本類型：支持單管、八聯(lián)排或16孔試管，樣本容積15-100μL。常用樣本包括組織勻漿液、血液或水體濾膜提取物。

加樣規(guī)范：使用無菌移液器將樣本加入反應(yīng)管，避免交叉污染；陰性對照（無模板水）和陽性對照（已知病毒核酸）需同步加樣，驗證檢測有效性。

3. 運行檢測

熱循環(huán)反應(yīng)：將加樣后的反應(yīng)管放入熱循環(huán)模塊，關(guān)閉艙門，啟動程序。儀器自動完成變性、退火、延伸步驟，全程無需人工干預(yù)。

熒光信號采集：每個循環(huán)結(jié)束后，熒光檢測系統(tǒng)實時采集FAM、HEX通道信號，生成擴增曲線。

4. 結(jié)果分析

閾值設(shè)定：軟件自動設(shè)定基線閾值，計算Ct值（循環(huán)閾值）。Ct值≤35且擴增曲線呈“S”型，判定為陽性；Ct值>35或無擴增，判定為陰性。

報告導(dǎo)出：檢測完成后，保存結(jié)果并打印報告，記錄樣本編號、病毒名稱、Ct值及檢測結(jié)論。

二、注意事項：細節(jié)決定檢測成敗

1. 環(huán)境與操作規(guī)范

溫濕度控制：儀器運行環(huán)境溫度需保持在10-30℃，濕度20%-80%；運輸或貯存時，溫度范圍擴展至-20-55℃，但需避免頻繁溫變。

防污染措施：加樣前需用75%酒精擦拭操作臺，佩戴一次性手套；移液器槍頭、反應(yīng)管需高壓滅菌，避免核酸殘留導(dǎo)致假陽性。

2. 樣本處理要點

樣本質(zhì)量：組織樣本需快速冷凍保存（-20℃以下），避免反復(fù)凍融；水體樣本需通過0.45μm濾膜過濾，去除雜質(zhì)。

核酸提?。菏褂蒙逃煤怂崽崛≡噭┖?，嚴格按照說明書操作，確保核酸濃度≥10ng/μL，OD260/280比值在1.8-2.0之間。

3. 安全與維護

輻射防護：雖qPCR檢測無電離輻射，但需避免直接接觸X射線管（如有）；操作完成后，關(guān)閉儀器電源，拔掉插頭。

日常清潔：每周用干布擦拭儀器外殼，清理散熱孔灰塵；每月檢查熒光檢測系統(tǒng)光路，確保無灰塵遮擋。

校準與維修：每半年聯(lián)系廠商進行光路校準和溫控精度檢測；若出現(xiàn)控溫異常（>±0.1℃）或熒光信號波動，需立即停機檢修。

三、結(jié)語：科學使用，賦能水產(chǎn)養(yǎng)殖

魚蝦病毒檢測儀的精準度與穩(wěn)定性，直接關(guān)系到水產(chǎn)養(yǎng)殖疫病的防控效果。通過標準化操作流程、嚴格的環(huán)境控制、規(guī)范的樣本處理及定期的設(shè)備維護，用戶可最大限度降低檢測誤差，提升疫病預(yù)警能力。未來，隨著qPCR技術(shù)與AI算法的融合，設(shè)備將進一步實現(xiàn)自動化、智能化，為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供更強技術(shù)保障。